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干貨 | 正確使用培養(yǎng)試劑,詳解細胞侵襲實驗


細胞侵襲簡介

細胞侵襲實驗是一種體外實驗方法,通過構建人工基底膜,模擬體內(nèi)細胞外基質(zhì)的環(huán)境,觀察細胞在此環(huán)境中的侵襲能力。實驗通常使用細胞小室,上室接種腫瘤細胞,下室加入趨化因子或完全培養(yǎng)基,通過檢測細胞穿越基底膜進入下室的數(shù)量來反映細胞的侵襲能力。

實驗目的

通過細胞侵襲對比實驗,研究耐思基質(zhì)膠和進口品牌基質(zhì)膠在侵襲過程中侵襲能力的對比,以及耐思胎牛血清和進口胎牛血清在在該實驗過程中的效果差異,為腫瘤細胞的侵襲機制提供實驗對比依據(jù)。


實驗過程

 鋪膠→接種→培養(yǎng)→染色→觀察 

1. 按照說明書,用無血清培養(yǎng)基稀釋基質(zhì)膠,加入耐思細胞小室上室,鋪滿底部進行孵育成膠。

2. 吸出上室中多余液體,使用無血清培養(yǎng)基接種細胞,下室加入完全培養(yǎng)基,放回小室時注意不要產(chǎn)生氣泡。

3. 將細胞小室板放回37℃、5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

4. 棄去上室和下室的培養(yǎng)基,使用PBS清洗上室和下室。用棉簽輕輕擦去上室中未侵襲的細胞,加入固定劑固定30分鐘。晾干小室,加入結(jié)晶紫溶液染色30分鐘。

5. 棄去結(jié)晶紫溶液,使用PBS清洗后晾干小室。

6. 顯微鏡觀察并拍照記錄實驗結(jié)果。

實驗結(jié)果


根據(jù)實驗染色結(jié)果可見:

1. 在侵襲實驗中,耐思基質(zhì)膠與進口C品牌基質(zhì)膠效果無明顯差異;

2. 在侵襲實驗中,胎牛血清作為影響因子,耐思南美胎牛血清效果雖略低于進口G品牌胎牛血清,但優(yōu)于某品牌進口血源的胎牛血清;

3. 綜合顯示,在細胞侵襲實驗中,耐思的細胞小室、耐思胎牛血清、耐思基質(zhì)膠等耗材,可以支持完整的侵襲實驗流程,提供完善的耗材支持。


選購指南

一、細胞小室


二、胎牛血清



三、GelNest?基質(zhì)膠


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